博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的酶標儀作為國產(chǎn)自主研發(fā)設備，采用先進的雙波長光路設計與精準溫控系統(tǒng)，支持96孔板檢測，可適配多種ELISA試劑盒。

一、材料與方法

（一）儀器與試劑

1、核心儀器：博清生物酶標儀；對照儀器為某進口品牌酶標儀；qPCR儀。

2、試劑：HBsAg ELISA檢測試劑盒、IAV NP ELISA檢測試劑盒、SARS-CoV-2 S蛋白ELISA檢測試劑盒；HBV、IAV、SARS-CoV-2標準品；陰性對照品（健康人血清/咽拭子裂解液，經(jīng)qPCR驗證無目標病毒）；其他試劑均為試劑盒配套產(chǎn)品。

（二）樣本來源

1、HBV相關樣本：50例（25例qPCR陽性慢性乙肝患者血清，25例健康體檢者血清）；

2、IAV相關樣本：50例（25例qPCR陽性流感患者咽拭子裂解液，25例健康人咽拭子裂解液）；

2、SARS-CoV-2相關樣本：50例（25例qPCR陽性感染者鼻咽拭子裂解液，25例健康人鼻咽拭子裂解液）。

（三）實驗方法

1、靈敏度檢測：將HBV、IAV、SARS-CoV-2標準品用稀釋液梯度稀釋，每個濃度設3個重復孔，按ELISA試劑盒說明書操作。以“OD值≥2.1×陰性對照OD值”為陽性判定標準，最低陽性濃度即為最低檢出限。

2、特異性檢測：取HBV陽性樣本分別與IAV、SARS-CoV-2 ELISA試劑盒反應，IAV陽性樣本分別與HBV、SARS-CoV-2試劑盒反應，SARS-CoV-2陽性樣本分別與HBV、IAV試劑盒反應，設陰性對照與陽性對照，檢測OD值，計算交叉反應率。

3、重復性檢測：選取3個濃度的標準品，每個濃度設6個重復孔，同批次檢測，連續(xù)檢測3天，計算CV值。

二、結果

（一）靈敏度結果

博清生物酶標儀對3種病毒標志物的最低檢出限均低于試劑盒說明書要求。

（二）特異性結果

所有交叉反應試驗中，待檢病毒與非目標試劑盒反應的OD值均<2.1×陰性對照OD值，交叉反應率為0%，表明博清生物酶標儀檢測無交叉反應，特異性良好。

（三）重復性結果

批內與批間重復性試驗的CV值均<5%，符合臨床檢測重復性要求（CV<10%），表明博清生物酶標儀檢測穩(wěn)定性良好。

（四）臨床樣本檢測結果

博清生物酶標儀與進口酶標儀對150例臨床樣本的檢測符合率無顯著差異（P>0.05），且兩者與qPCR的符合率均>90%，表明博清生物酶標儀臨床適用性良好。

三、討論

本研究從性能驗證與臨床應用兩方面，系統(tǒng)評估了博清生物酶標儀在病毒性疾病病原體檢測中的價值，核心發(fā)現(xiàn)如下：

（一）靈敏度與特異性滿足臨床需求：博清生物酶標儀對HBsAg、IAV NP及SARS-CoV-2S蛋白的LOD均低于試劑盒要求，且無交叉反應，這得益于其雙波長光路設計——通過參考波長校正背景干擾，減少非特異性吸附對OD值的影響，從而提升檢測靈敏度與特異性。相較于傳統(tǒng)單波長酶標儀，該設計可有效降低假陰性與假陽性率，尤其適用于低濃度病毒樣本（如早期感染患者）的檢測。

（二）重復性與穩(wěn)定性優(yōu)異：批內、批間CV值均<5%，表明儀器光學系統(tǒng)與溫控系統(tǒng)穩(wěn)定性良好。博清生物酶標儀采用進口光源與光電倍增管，確保波長精度與信號采集的一致性；同時，其96孔板均一性溫控（±0.5℃）可避免孵育溫度差異導致的酶促反應效率波動，進一步保障檢測重復性。

（三）臨床應用性價比高：與進口酶標儀相比，博清生物酶標儀的臨床符合率僅低2%，無統(tǒng)計學差異，但設備采購成本降低約30%，且耗材兼容性強（可適配國內外主流ELISA試劑盒）。此外，其操作軟件支持樣本信息錄入、結果自動判讀與數(shù)據(jù)導出，簡化了批量檢測流程，適合基層醫(yī)療機構或科研實驗室的高通量篩查需求。

（四）研究局限性

本研究僅納入3種病毒，未來需拓展至其他常見病毒性疾?。ㄈ绫透窝撞《?、水痘 - 帶狀皰疹病毒）的檢測驗證；

樣本量較?。?50例），需擴大樣本量進一步驗證儀器的臨床適用性；

未評估儀器在極端環(huán)境（如高溫、高濕）下的性能，后續(xù)可開展環(huán)境適應性試驗。

（五）應用展望

博清生物酶標儀可在以下場景發(fā)揮重要作用：

1、基層醫(yī)療篩查：用于病毒性疾?。ㄈ缌鞲?、乙肝）的初篩，降低qPCR的檢測壓力；

2、科研領域：支持病毒感染機制研究（如病毒載量動態(tài)監(jiān)測）、疫苗免疫原性評估（如抗體效價檢測）；

3、突發(fā)公共衛(wèi)生事件應急響應：在病毒暴發(fā)時快速開展批量樣本篩查，助力疫情防控。

四、結論

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的酶標儀在病毒性疾病病原體檢測中具有靈敏度高、特異性強、重復性好、性價比高的優(yōu)勢，可滿足臨床科研與基層醫(yī)療的檢測需求。該儀器的推廣應用將為病毒性疾病的早期診斷與防控提供可靠的技術支撐，同時推動國產(chǎn)酶標儀在醫(yī)學檢測領域的自主創(chuàng)新發(fā)展。