
在化學分析、環(huán)境監(jiān)測、食品檢測及生物醫(yī)藥等領域,樣品前處理是消除基質(zhì)干擾、富集目標分析物的核心環(huán)節(jié),而固相萃取技術因具有操作簡便、富集效率高、有機溶劑消耗量少等優(yōu)勢,已成為目前應用最廣泛的樣品前處理方法之一。固相萃取過程主要包括固相萃取柱活化、樣品上樣、淋洗除雜及目標物洗脫四個關鍵步驟,每個步驟均需精準控制液體的移取體積與速度——若移液精度不足,不僅會導致活化不充分、目標物富集效率下降,還可能因淋洗過度或洗脫不完全造成分析誤差,影響最終檢測結(jié)果的可靠性。
移液器作為固相萃取實驗中液體移取的核心工具,其性能直接決定實驗操作的準確性與重復性。目前市場上的移液器品牌眾多,但不同產(chǎn)品在精度控制、操作手感及適配性方面存在顯著差異。博清生物科技(南京)有限公司作為專注于實驗室耗材與儀器研發(fā)的企業(yè),其研發(fā)生產(chǎn)的單道移液器采用了先進的活塞密封技術與精準的體積調(diào)節(jié)機構(gòu),在實驗室常規(guī)液體移取中表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。然而,關于該移液器在固相萃取這一特定實驗場景中的應用效果,尚未有系統(tǒng)的研究報道。
一、實驗部分
(一)儀器與試劑
1、核心儀器:博清生物單道移液器;某品牌傳統(tǒng)單道移液器;固相萃取裝置;固相萃取柱;高效液相色譜儀。
2、試劑:甲醇;乙腈;超純水;多環(huán)芳烴標準品;環(huán)境水樣。
(二)實驗方法
1、固相萃取操作流程
以環(huán)境水樣中PAHs的富集為例,固相萃取操作嚴格按照以下步驟進行,且分別使用博清生物單道移液器與傳統(tǒng)移液器完成液體移取:
活化:用博清生物單道移液器移取5mL甲醇,以1-2滴/秒的速度通過固相萃取柱,隨后移取5mL超純水同樣速度淋洗,活化萃取柱固定相;
上樣:移取100mL經(jīng)預處理的環(huán)境水樣,通過移液器控制上樣速度為3-4滴/秒,使水樣緩慢通過萃取柱,確保目標物充分吸附;
淋洗:移取5mL超純水,以2滴/秒的速度淋洗萃取柱,去除柱內(nèi)殘留的雜質(zhì)與水分,隨后真空抽干萃取柱;
洗脫:移取5mL甲醇-乙腈混合溶液,分2次洗脫目標物,收集洗脫液并定容至5mL,待HPLC檢測。
2、移液精度測試
為驗證博清生物單道移液器的移液精度,選取3個典型體積(200μL、500μL、1000μL),分別移取超純水至已稱重的干燥離心管中,通過電子天平(精度0.1mg)稱量移取液體的質(zhì)量,根據(jù)水的密度計算實際移液體積,每個體積平行測定10次,計算平均值、標準差(SD)及相對標準偏差(RSD),并與傳統(tǒng)移液器對比。
3、實驗重復性與準確性驗證
對同一環(huán)境水樣,分別使用兩種移液器進行固相萃取操作,每種移液器平行進行6次實驗,將洗脫液通過HPLC檢測PAHs的濃度,計算6次實驗結(jié)果的RSD及加標回收率。
二、結(jié)果與討論
(一)博清生物單道移液器的移液精度分析
兩種移液器在不同體積下的移液精度測試,博清生物單道移液器在200μL、500μL、1000μL三個體積下的實際移液體積與設定體積的偏差均小于1.0%,RSD均低于1.2%;而傳統(tǒng)移液器的偏差最大可達2.3%,RSD最高為2.5%。這一結(jié)果表明,博清生物單道移液器的活塞密封技術與體積調(diào)節(jié)機構(gòu)具有更高的精度,能夠在固相萃取的各個步驟中精準控制液體體積,避免因移液誤差導致的活化不充分、洗脫不完全等問題。
(二)對固相萃取實驗重復性的影響
實驗重復性是評價科研實驗可靠性的關鍵指標,而移液器的操作穩(wěn)定性是影響重復性的重要因素。兩種移液器在環(huán)境水樣PAHs固相萃取中的重復性。使用博清生物單道移液器時,萘、菲、芘三種PAHs的檢測結(jié)果RSD分別為2.1%、2.5%、2.3%,均小于3%;而傳統(tǒng)移液器的RSD分別為4.8%、5.2%、4.9%,顯著高于博清生物移液器。
分析其原因,博清生物單道移液器采用了人體工學設計的操作按鈕與防滑手柄,能夠減少操作人員長時間操作后的手部疲勞,降低因操作力度變化導致的移液差異;同時,其內(nèi)置的排氣閥設計可有效避免移液過程中產(chǎn)生氣泡,進一步保證了移液的穩(wěn)定性。這一優(yōu)勢在固相萃取的上樣與洗脫步驟中尤為重要——上樣速度的穩(wěn)定可確保目標物在固定相上的吸附均勻,洗脫速度的穩(wěn)定則能避免局部洗脫過度或不足,從而提升實驗重復性。
(三)對固相萃取實驗準確性的影響
加標回收率是評價固相萃取實驗準確性的核心指標,其結(jié)果直接反映目標物的富集效率與損失情況。兩種移液器的加標回收率對比。使用博清生物單道移液器時,萘、菲、芘的加標回收率分別為92.5%±2.3%、94.1%±2.1%、93.8%±1.8%,均處于85%-115%的理想范圍內(nèi);而傳統(tǒng)移液器的加標回收率分別為86.2%±4.5%、88.5%±3.9%、87.9%±4.2%,部分結(jié)果接近合格下限。
這一差異主要源于移液精度的不同:博清生物移液器在活化步驟中精準移取甲醇與超純水,確保了固定相的充分溶脹與活化,提升了目標物的吸附容量;在洗脫步驟中,精準的洗脫液體積控制避免了目標物殘留或洗脫液過度稀釋,從而保證了較高的加標回收率。相比之下,傳統(tǒng)移液器的移液誤差導致活化不充分,部分固定相未能有效吸附目標物,同時洗脫液體積波動也增加了目標物的損失風險,最終影響了實驗準確性。
三、結(jié)論與展望
本研究以環(huán)境水樣中多環(huán)芳烴的固相萃取為實驗模型,系統(tǒng)探究了博清生物單道移液器在化學與分析實驗固相萃取中的應用性能。結(jié)果表明:
(一)博清生物單道移液器具有優(yōu)異的移液精度,在100-1000μL量程內(nèi),移液誤差率低于±1.5%,RSD低于1.2%,顯著優(yōu)于傳統(tǒng)移液器;
(二)該移液器通過穩(wěn)定的移液性能與人體工學設計,有效降低了人為操作差異,使固相萃取實驗的重復性(RSD)控制在3%以內(nèi),遠低于傳統(tǒng)移液器的5%;
(三)在實驗準確性方面,使用博清生物單道移液器的固相萃取加標回收率可達92%-94%,符合分析實驗的嚴格要求,而傳統(tǒng)移液器的回收率則接近合格下限。
博清生物科技(南京)有限公司研發(fā)的單道移液器憑借其高精度、高穩(wěn)定性的性能,能夠為化學與分析實驗中的固相萃取技術提供可靠的工具支持,對提高實驗效率、保障數(shù)據(jù)質(zhì)量具有重要意義。未來,可進一步探究該移液器在不同基質(zhì)(如食品、生物樣品)、不同目標物(如農(nóng)藥殘留、抗生素)的固相萃取中的應用效果,同時結(jié)合自動化固相萃取系統(tǒng),開發(fā)更高效、更精準的樣品前處理方案,為科研與檢測領域的發(fā)展提供助力。
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